PENGANTAR
Hingga kini banjak penelitian dilakukan dipelbagai bidang jang ditudjukan untuk memetjah persoalan penjakit diabetes mellitus. Salah satu tudjuan tersebut adalah mentjari obat antidiabetes oral, sehingga dapat menggantikan insulina jang harus diberikan lewat suntikan.
Menurut Kloppenburg-Versteegh (1) maka daun Sambiloto, Andrographis paniculata Nees, digunakan oleh rakjat sebagai obat terhadap kentjing manis. Ini dikerdjakan sebagai berikut: 21 lembar daun kering (= 1,2 gram) dimasak dengan 2 gelas air hingga volume achirnja mendjadi separohnia. Ini diminum sekaligus.
Adanja efek hipoglisemik mennang telah kami buktikan lewat pertjobaan-pertjobaan dengan kelintji dan dengan orang² normal dan penderita² diabetes (8 pria dan 8 wanita). Sebagai pembanding dipakai obat adiabil (2).
Mengingat bahwa daun Sambiloto itu mempunjai sifat hipoglisemik, maka penelitian lebih landjut perlu dilakukan. Disini akan dilaporkan pengaruh ekstrak daun Sambiloto terhadap respirasi sel.
BAHAN2 DAN TJARA2
Semua zat kimia adalah murni, ketiuali apabila disebut lain.
Djantung sapi jang dipakai untuk pertjobaan² respirasi diambil dari pedjagalan dalam keadaan segar dan dibawa ke-laboratorium pada suhu sekitar \(0^{\circ}\)C.
Homogenat djantung sapi dibuat dari djantung segar jang telah dibebaskan dari lemak dan djaringan² penghubung. Ini diiris dan digiling dengan alat penggiling chusus. Dari gilingan ini ditimbang beberapa gram dan disuspensikan kedalam buffer salina-fosfat pH 7,4 sehingga didapat 12 % (b/v) homogenat. Semua kerdjaan dilakukan pada suhu 0 2°C.
Buffer salina-fosfat terdiri dari tjampuran 1000 ml 0,9 % (b/b) NaCl. 40 ml 1,15 % (b/b) KCl, 10 ml 3,84 % (b/b) MgSO<sub>1</sub>.7H<sub>2</sub>O dan 300 ml 0.1 M buffer fosfat pH 7,4.
0,1 M buffer fosfat pH 7,4 terdiri dari 19,0 ml 0,2 M NaH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub> (27,8 gram dalam 1 liter) jang ditjampur dengan 81,0 ml 0,2 M Na<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>. 12H<sub>2</sub>O (71,7 gram dalam 1 liter) dan dientjerkan sampai 200 ml; pH-nja dikoreksi sampai 7,4 dengan memakai Beckman Zeromatic pH-meter.
Dann Sambiloto, Andrographis paniculata Nees, diperoleh dari kebun atau dari perdagangan setelah mengalami pemeriksaan. Tangkainja tidak dipakai.
Ekstrak daun Sambiloto dibuat dengan mengekstraksi 5 gram serbuk daun dalam 625 ml air diatas pengangas air selama 30 menit. Selama pemanasan volumenja diusahakan tetap (tambah air bila perlu). Sesudah dingin, disaring dan filtratnja dipakai untuk pertjobaan².
Pensukuran pemakaian oksigen dilakukan sctjara rnanometris dcnsan alat Warhurg Pacla 30oC. Ket.jcPltan 1tc:rnal<aian oksisen, QO1, rliclefinisikan scbasai lrcrnaliaian oksicern rlllarn 1,1/rljarrr/rrrg bcrat licring hornogcnlrt (ljantung.
Bcrat kcring hornosc'rtat cl.iantrrne <lilalnrl<an rlengan cljalan nrenranasi 0,!r rnl lrornosenat rlalarrr tjarvan alurninium pada 100ofl st'lanra 24 cliarn. l)c'narnbahan bcrat tjarvan scsrrclah p('lnanasan arlalah bc-rat kcring homoqcnat.
Pernl-xatan ekstrak kcrins rlarrn Sarlbiloto dilakul<arr scbagai berikut: 100 qra.rn scrbuk rlarrn Sarnbiloto rlicl<stral<si rlcnrlan air cliatas l)cnrJanqas air selarnn 30 rncrrit. Selarna pcnranasan r-olurnc air (1250 nrl) rlitrsahakan tctal) (l('n!:rlr '1rcnarrrhahan air anll'rila. pr.rlrr. Sc'srr<l;rh rlirre.in rlisortrifrrqal rlan <lipis;rhkan srrperna.tan dari cncla.pannia. Supernatan jang rlipcrolch l<r'rntrrlian dirrapkan Trarla tckanan rcnclah rlan achirnia clil<r'rinql<an rliatas l)cnqanqa:i air. Achirn.ia zat kcrirq ini <liqenrs sarnpai nicnrliadi serhrrli.
Lnrrrtnn ckstrak l<r'ring rlarrn Sarrrhil,rto iang tliDrlitri rrntrrk r'lisperimlrt: rlillrat <lcnqan <llalan rnt'l;rnrtkan 0.9607 srarrr scrhrrk ekstral< kcrinq rlalam 110 rrrl rir rlietrs uerrganqns air sclema 30 rrrcnit. Ail janq lnenquat) selama l)nl)enasrn rlieanti. Kerrrrr<lian <lisarinq rrrclalrri saringa.n l<crtas. Filtra.tnia tlipekai rrntuk r)crt.iobaan?.
NKSPNRINIIIN DAN IINSII,
Darrrt Sarrrhiloto ianc rlipalirri rrntrr'li scrrrrr:r el<spclirr.rt'n2 disirri tolalr rlirrirrt:rliarr rrrcrrrpurriai cfcl< hirroq]iscnrik. fni rlirrrlii tlcngan liclirrtii r)('nlrrlrt tiera.r ians rlirrtarahan <lnllnr (2). lhri tlarrn irri kerttrrrlian rlihuat r.kstr:rk :1talr rrr('l)arat <lcngan nrctorla.i ianq t<'la.h rlirrr':rilian Pa<l:r lral'r Bnhe.ne <lan Tirr:r2.
l. lifck clislraL darur lcrhadap rcspirasi rliarinqan.
Pt'ltglrtralrrrr rlilrrlirrl,at, rlcnr';rrr;rl;rt W;tr'lrrrrg l;r,'l;r 3{lo(: tlcrtlen kctcntrrarrJ lr:r<la lllrrr W:rllrrrnl i:rr11 rrrcrrrllrrrirLi <lrr;r. tial)arrq snrnping sr'lraqai bcrikrrt.
Rrranrl utrlua : ?.9 rnl horrroqcnrrt rlianlrrrr..{.
'I'.j:rlxrrrrl s;rrrrpinrl : Ilcrqanti-qarrt irliisi <lcnr.l:rrr 0.2 rrrl: 0.3 rlrl: 0.4 rnl:
<lan 0.6 rrrl clistt:rl< rlarrrt. Volrrrrr<'ur'lrir rlitlj:r<liliart 0,6 rnl l<alarr pcrlu tlcnqan penantlxthrn :tir.
{]'ntrrlt kontrol rliPakai 0.6 rnl air.
Tiau'an tcnrJ:rlr : 0.? rrrl KOTI 20 (i. (h/b\.
IIasil porilanrat.an tcllih:it prrtla. trbt'l l. D jt'laslalr <lisitu brlnr.a rnaliin tirrqei Iia(lar ckstrali rlarrtt iutrq clipa.kai. rna l<a tttaltin tinggi pula. cfcli irrlrilrisinjl tcrhadap rcspirasi honrosenat.
llonrogcnat rljantune sentliri (l<ontr-ol ) tanPa pcnarnbzrh:rn substrat, ternjata rnernpurrj:ri respir:rsi jang tjul<up bcsar. Kt'nrungliinan besar bahrva hal ini clist:babli.arr lialcrra tjailansan substrat rlirlalalrnja niasih tjukul> baniak.
Tabel 1. Efek berbagai kadar ekstrak daun Sambiloto terhadap respirasi homogenat djantung sapi. Resp. = respirasi. Untuk keterangan lebih landjut, lihat teks.
| Ekstrak daun | Berat kering homogenat (mg) | Kontrol | Eksperimen | % inhi- | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| \[\begin{array}{|c|c|c|}\hline \textbf{Resp.} \\ \mu \textbf{l} \ \textbf{O}_2 \\ \end{array}\] | \(QO_2\) | QO2 (rata2) | Resp. μl O2 | \(QO_2\) | QO2 (rata2) | bisi | ||
| 0,2 ml | 91,1 | -402,85 | —4,42 | _3,08 | 329,68 | -3,62 | _2,80 | + 9 |
| 80,1 | —1,12 —3,09 | -0,00 | —325,66 —317,47 | —3,96 | , 0 | |||
| • | -246,95 | , in the second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second second | ||||||
| 64,3 | —215,77 | 3,36 | -173,66 | 2,70 | ||||
| 75,9 | 111,00 | 1,46 | - 69,03 | 0,91 | ||||
| 0,3 ml | 91,1 | -402,85 | -4,42 | -3,08 | —375,63 | -4,10 | -2,68 | +13 |
| 80,1 | 246,95 | 3,09 | -299,71 | -3,74 | ||||
| 64,3 | -215,77 | 3,36 | 132,19 | -2,06 | ||||
| 75,9 | —111,00 | 1,46 | - 61,83 | 0,82 | ||||
| 0.4 ml | 91,1 | -402,85 | 4,42 | —3,08 | 371,61 | 4,08 | -1,93 | +37 |
| 64,3 | _215,77 | -3,36 | 80,64 | _1,26 | ||||
| 75,9 | —111,00 | —1,46 | _ 34,27 | 0,45 | ||||
| 0,6 ml | 91,1 | 402,85 | 4,42 | 3,62 | -338,01 | _3,71 | -2,26 | +38 |
| 80,1 | -246,95 | -3,09 | -167,41 | -2,09 | ||||
| 64,3 | —215,77 | -3,36 | — 63,27 | 0,99 | ||||
| · | - ,- • | 1 22,21 | , , | |||||
Tabel 2. Efek berbagai kadar larutan ekstrak Sambiloto kering terhadap respirasi homogenat djantung sapi Resp. = respirasi. Untuk keterangan lebih landjut lihat teks dan bab Bahan² dan Tjara².
| Til-otop la | Berat kering | Kontrol | Eksperimen | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Ekstrak (ml) | homogenat (mg) | Resp. \((\mu l \ O_2)\) | \(QO_2\) | \[\begin{array}{c} {\bf Resp.} \\ (\mu {\bf l} \ {\bf O}_2) \end{array}\] | QO2 | % Inhibisi | |
| 0,1 | 80,6 | 495,14 | 6,15 | 313,40 | 3,89 | +37 | |
| 0,2 | 80,6 | 495,14 | 6,15 | 231,17 | 2,87 | +53 | |
| 0,3 | 80,6 | -495,14 | 6,15 | —154,22 | -1,92 | +69 | |
| 0,4 | 80,6 | 495,14 | 6,15 | —126,55 | 1,57 | +74 | |
2. Efek ekstrak kering daun terhadap respirasi djaringan.
Dalam eksperimen disini diselidiki pengaruh ekstrak kering daun. Untuk ini digunakan larutannja jang dibuat menurut prosedur jang tertjantum dalam bab Bahan² dan Tjara².
Pengamatannja dilakukan setjara manometris dengan alat Warburg dengan ketentuan² sebagai berikut:
Ruang utama : 2,4 ml homogenat djantung.
Tjabang samping: Berganti-ganti diisi dengan 0,1 ml; 0,2 ml; 0,3 ml;
dan 0,4 ml ekstrak kering daun dalam larutan. Volume achir dibuat 0,4 ml, kalau perlu ditambah
air. Untuk kontrol dipakai 0,4 ml air.
Tjawan tengah : 0.2 ml KOH 20 % (b/b).
Dari hasilnja pada tabel 2 ternjata bahwa ekstrak kering daun djuga masih mengandung inhibitor respirasi djaringan.
DISKUSI
Dari hasil² penelitian disini dapatlah ditarik kesimpulan bahwa ekstrak daun Sambiloto dan larutan ekstrak keringnja mempunjai efek penghambatan respirasi djaringan. Apakah efek ini diberikan oleh zat jang sama dalam daun Sambiloto jang bersifat hipoglisemik belum dapat dikatakan disini. Untuk ini masih diperlukan penelitian jang lebih landjut, setelah zat² jang berchasiat fisiologis telah dapat diisolasi.
Mengingat adanja efek samping jang berbahaja tadi, maka penggunaan obat minuman ekstrak daun Sambiloto mengandung bahaja djuga. Sebelum diketahui zat² penjebabnja dan sebelum ada standardisasi setjara ilmiah mengenai daun Sambiloto, maka tidak dapat dibuat preparat² galenika jang dapat dipertanggung djawabkan.
Isolasi zat² jang berchasiat tersebut dan penelitian selandjutnja sedang dilakukan.